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更新時間:2025-12-08
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一、GoldBio熒光素鉀鹽核心概述
GoldBio的熒光素鉀鹽,是螢光素酶的天然底物。在ATP和氧氣的存在下,螢光素酶會催化熒光素發生氧化反應,產生生物發光信號(發出波長為560nm左右的黃綠色光)。
二、GoldBio熒光素鉀鹽如何使用(標準流程簡述)
通常需要將其配制成工作液。一個常見的體外檢測配方如下:
1. 配制儲存液(如100mM):
稱取適量熒光素鉀鹽粉末,溶于pH 7.8左右的緩沖液(如 Tris、HEPES)或無菌水中。
過濾除菌,分裝避光保存于-20°C或-80°C。
2. 配制工作液(1X):
使用前,將儲存液用檢測緩沖液稀釋至所需濃度(通常為0.1-1mM)。
工作液中通常還需加入輔酶A,以穩定發光信號,獲得持續的“輝光型”發光而非一閃而過的“閃光型”。
3. 檢測:
對于細胞:棄去培養液,加入工作液,裂解細胞并混勻后,立即用酶標儀(化學發光模塊)或發光計檢測。
對于動物:腹腔注射一定劑量(如150mg/kg)的熒光素鉀鹽(溶于PBS),等待約10-15分鐘讓其在體內分布均勻后,進行成像。
三、GoldBio熒光素鉀鹽優勢與注意事項
優勢:
性價比高:相比許多品牌的預混檢測試劑盒,自行購買粉末配制成本更低,尤其適合大批量實驗。
靈活性高:可根據實驗需求自行優化工作液的配方(如緩沖液pH、離子強度、添加輔酶A等)。
水溶性好:鉀鹽形式解決了溶解難題。
四、GoldBio熒光素鉀鹽注意事項
1. 避光保存:熒光素對光敏感,粉末和溶液均應避光保存,以防降解。
2. 無菌操作:用于體內注射時,溶液必須經過無菌過濾(0.22μm濾膜),并確保無熱原。
3. pH敏感性:螢光素酶反應的最適pH約為7.8,緩沖液pH至關重要。
4. 體內注射濃度:需根據動物模型和成像系統優化注射劑量和成像時間。
五、總結與選購建議
GoldBio的熒光素鉀鹽是一款可靠、經濟的基礎性發光底物。
如果您需要:自行建立或大量進行螢光素酶報告基因實驗、ATP檢測,或為活體成像配制注射劑,那么購買GoldBio的熒光素鉀鹽粉末自行配制,是具成本效益的選擇。
如果您需要:進行少量、便捷的常規報告基因檢測,且對操作便捷性要求高,那么直接購買預混好的“輝光型”螢光素酶檢測試劑盒(如Promega, Beyotime等)可能更節省時間和保證結果穩定性。
簡單來說,GoldBio熒光素鉀鹽是“原材料”,適合動手配制和優化體系的用戶;而試劑盒是“即食餐”,適合追求標準化和快速流程的用戶。
GoldBio,Promega, Beyotime代理——天津益元利康生物科技有限公司,歡迎咨詢選購。
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