瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)的試驗(yàn)方法是什么？注意事項(xiàng)有什么？

你知道瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)方法是什么嗎？有什么注意事項(xiàng)呢？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)方法

1. 擇適合樣品預(yù)期片段大小的瓊脂糖凝膠濃度百分比。將瓊脂糖粉末與用于運(yùn)行凝膠的相同類型的緩沖液（TAE）結(jié)合起來(lái)，加熱使混合物融化，避免沸騰。

2. 選擇所需尺寸的凝膠澆注模具和梳子，為樣品和marker提供足夠數(shù)量的孔，以及容納每個(gè)待裝樣品數(shù)量的孔容量。

3. 膠凝固后，將凝膠放入電泳儀中，電泳液沒(méi)過(guò)凝膠，根據(jù)加入量的多少，決定混合多少ul的loding buffer，將樣液混合loding buffer用移液槍加入到凝膠中。

4. 蓋上蓋子，確保電極和蓋子的方向正確，注意正負(fù)極， 打開(kāi)電泳儀 ，設(shè)定凝膠運(yùn)行的時(shí)間和電壓，根據(jù)樣品大小確定運(yùn)行時(shí)間。

二、瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

1. 瓊脂糖凝膠溶液配制時(shí)總液體量不宜超過(guò)錐型瓶50%容量。

2. 加熱時(shí)可以中途搖動(dòng)搖動(dòng)，防止瓊脂糖凝膠凝在錐形瓶底部。

3. 注意不要損傷梳底部的凝膠。防止加樣時(shí)樣品漏出。

4. 凝膠濃度越低，分辨的片段越大；凝膠濃度越高，分辨的片段越小。

5. 使用紫外透射儀觀察，紫外光對(duì)DNA 分子有損傷作用，不可長(zhǎng)時(shí)間照射。從膠上回收DNA時(shí)，應(yīng)盡量縮短光照時(shí)間以減少紫外光切割DNA。

6. 紫光燈下觀察時(shí)應(yīng)戴上防護(hù)鏡，以免損傷眼睛。

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