Active Motif抗體產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

背景：5-甲基胞嘧啶（5-甲基胞苷）是一種修飾堿基，存在于植物和脊椎動(dòng)物的DNA中。脫氧核糖核酸甲基化是一種表觀遺傳學(xué)事件，其中DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNMT）催化甲基與CpG二核苷酸中胞嘧啶的第五個(gè)碳原子。這種修飾有助于控制基因表達(dá)，并參與基因組印跡，而異常的DNA甲基化通常與疾病有關(guān)。5-甲基胞苷抗體（克隆33D3）已被開(kāi)發(fā)用于區(qū)分修飾的堿基和正常的胞嘧啶對(duì)應(yīng)物，從而允許基因啟動(dòng)子甲基化分析。

免疫原：克隆33D3識(shí)別植物和脊椎動(dòng)物DNA中發(fā)現(xiàn)的修飾堿基5-甲基胞苷。

緩沖液：在10mM磷酸鹽、0.15M NaCl和0.01%硫柳汞中純化的IgG。硫柳汞具有Ju毒。

儲(chǔ)存：部分產(chǎn)品可在室溫下運(yùn)輸，這不會(huì)影響其穩(wěn)定性。在-20°C下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)2小時(shí)，避免重復(fù)冷凍/循環(huán)解凍。不儲(chǔ)存時(shí)，將所有試劑置于冰上。本產(chǎn)品自收到之日起保修12個(gè)月。

本產(chǎn)品僅供研究使用，不用于診斷程序。

通過(guò)甲基DNA免疫沉淀（MeDIP）測(cè)試的5-甲基胞嘧啶抗體（mAb）（克隆33D3）

用Mse I消化的人DNA（500ng）進(jìn)行MeDIP，然后通過(guò)定量實(shí)時(shí)PCR用對(duì)正常甲基化（Xist、NYESO和SNRPN）或非甲基化（APC和p48）的基因特異的引物進(jìn)行分析。繪制了MeDIP的DNA（富集的DNA）。

免疫組織化學(xué)檢測(cè)5-甲基胞嘧啶（5-mc）抗體（pAb）

在福爾馬林固定的、石蠟包埋的人類黑質(zhì)（中腦）組織切片中檢測(cè)到點(diǎn)狀核染色模式。上圖：稀釋度為1:1000的5-mC抗體。底部面板：無(wú)一級(jí)抗體（單獨(dú)使用第二步抗體）